淡豆豉
1.实验分析
1.1 实验仪器及耗材
■ 色谱柱:Inertsil ODS-3 5µm 250 × 4.6mm(P/N:5020-01732)
■ GL Filter针式过滤器(GL0604 25mm x 0.22μm Nylon)
■ GL Vial样品瓶(GL0008 2mL透明瓶 带刻度+GL0143 红膜白胶垫片)
■ MPA-200 电动移液枪(1065-43503)
1.2 新旧药典对比
药典对比:新增,原15版标准未有含量测定方法,20版药典新增含量测定。
【
溶液配制】
对照品溶液的制备:取穿大豆苷元、染料木素对照品适量,精密称定,用甲醇制成每1ml各含20ul的混合溶液。
供试品溶液的制备:取本品粉末(过二号筛)1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25ml,称定重量,加热回流1小时,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
【
系统适用性要求】理论板数按大豆苷元和染料木素峰计算均应不低于5000。
1.3
色谱条件
色谱柱:Inertsil ODS-3 5µm 250 × 4.6mm(P/N:5020-01732)
流动相:乙腈:水(45:55)
流速:1ml/min
柱温:25℃
检测波长:225nm
进样量:10µl
柱压:108 bar
仪器型号:Thermo Ultimate 3000
检测器:DAD
2.
色谱结果与讨论
对照品图谱:
序号 |
名称 |
t/min |
峰面积 |
峰高 |
理论塔板数 |
拖尾因子 |
1 |
大豆苷元 |
22.053 |
20.538 |
49.406 |
17656 |
1.02 |
2 |
染料木素 |
54.677 |
33.211 |
32.444 |
17977 |
1.02 |
供试品图谱:
序号 |
名称 |
t/min |
峰面积 |
峰高 |
理论塔板数 |
拖尾因子 |
分离度 |
1 |
大豆苷元 |
22.113 |
10.128 |
24.122 |
17537 |
1.02 |
3.14 |
2 |
染料木素 |
54.877 |
10.085 |
9.882 |
18248 |
1.02 |
25.85 |
重现性:
大豆苷元:
进样针数 |
t/min |
峰面积 |
峰高 |
理论塔板数 |
拖尾因子 |
分离度 |
1 |
22.113 |
10.128 |
24.122 |
17537 |
1.02 |
3.14 |
2 |
22.163 |
10.425 |
25.087 |
17935 |
1.02 |
3.14 |
3 |
22.137 |
10.337 |
24.907 |
17960 |
1.02 |
3.15 |
4 |
22.067 |
10.263 |
24.764 |
17813 |
1.02 |
3.14 |
5 |
22.100 |
10.283 |
24.897 |
18030 |
1.01 |
3.13 |
染料木素:
进样针数 |
t/min |
峰面积 |
峰高 |
理论塔板数 |
拖尾因子 |
1 |
54.877 |
10.085 |
9.882 |
18248 |
1.02 |
2 |
55.053 |
10.410 |
10.298 |
18423 |
1.02 |
3 |
54.960 |
10.350 |
10.192 |
18448 |
1.02 |
4 |
54.763 |
10.300 |
10.183 |
18542 |
1.02 |
5 |
54.938 |
10.301 |
10.186 |
18455 |
1.02 |
3.
结论
大豆苷元和染料木素按照新2020版含量检测方法检测,供试品理论塔板数达17537和18248,且5次重复实验理论塔板数及保留时间没有下降,故Inertsil ODS-3适合用于2020版药典淡豆豉检测项下大豆苷元和染料木素的含量分析。