广陈皮
1. 实验分析
1.1实验仪器及耗材
■ 色谱柱：InertSustain C18 5µm 250 × 4.6mm （P/N:5020-07346）
■ GL Filter针式过滤器（GL0604 25mm x 0.22μm Nylon）
■ GL Vial样品瓶（GL0008 2mL透明瓶 带刻度+GL0143 红膜白胶垫片）
■ MPA-200 电动移液枪（1065-43503）
1.2 新旧药典对比
检测项目：广陈皮-含量测定
药典对比：修订，新增广陈皮的含量测定方法
原2015版药典同陈皮检测方法，测定“橙皮苷”
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-醋酸-水（35:4:61）为流动相；检测波长为283nm。理论板数按橙皮苷峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备：取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，即得。
供试品溶液的制备：取本品粗粉约1g，精密称定，置索氏提取器中，加石油醚（60～90℃）80ml，加热回流2～3小时，弃去石油醚，药渣挥干，加甲醇80ml，再加热回流至提取液无色，放冷，滤过，滤液置100ml量瓶中，用少量甲醇分数次洗涤容器，洗液滤入同一量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
现2020版药典测定“橙皮苷”和“川陈皮素”
【
溶液配制】
对照品溶液的制备：取橙皮苷对照品、川陈皮素对照品、桔红素对照品适量， 精密称定，加甲醇制成每 1ml 含橙皮苷 0.2mg、 川陈皮素25μg、 桔红素 15μg 的混合溶液，即得。
供试品溶液的制备：取本品粗粉（过二号筛）约 0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 25 ml，密塞，称定重量，超声处理（功率 300 W， 频率： 40kHz） 45 分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5µl，注入液相色谱仪，测定，即得。
【
系统适用性要求】理论板数按橙皮苷峰和川陈皮素峰计算应不低于2000。
1.3 色谱条件
色谱柱：InertSustain C18 5µm 250 × 4.6mm (P/N:5020-07346）
流动相：以乙腈为流动相A，水为流动相B，按下表中规定进行梯度洗脱
|
时间(min) |
流动相A(%) |
流动相B(%) |
检测波长(nm) |
|
0~10 |
22 |
78 |
283 |
|
10~20 |
22~48 |
78~52 |
283 |
|
20~35 |
48 |
52 |
330 |
流速：1ml/min
柱温：25℃
检测波长：283/330nm
进样量：5µl
柱压：108 bar
仪器型号：Thermo Ultimate 3000
检测器：DAD
2. 实验结果与讨论
对照品图谱：
检测波长283nm下的图谱
检测波长330nm下的图谱
|
序号 |
名称 |
t/min |
峰面积 |
峰高 |
理论塔板数 |
拖尾因子 |
|
1 |
橙皮苷 |
11.717 |
35.752 |
114.061 |
8973 |
1.09 |
|
2 |
川陈皮素 |
28.373 |
12.272 |
58.457 |
115038 |
1.03 |
|
3 |
桔红素 |
33.460 |
11.773 |
39.450 |
79045 |
1.03 |
供试品图谱：
检测波长283nm下的图谱
检测波长330nm下的图谱
|
序号 |
名称 |
t/min |
峰面积 |
峰高 |
理论塔板数 |
拖尾因子 |
分离度 |
|
1 |
橙皮苷 |
11.700 |
69.037 |
236.443 |
10310 |
1.07 |
|
|
2 |
川陈皮素 |
28.367 |
2.089 |
9.954 |
115163 |
1.05 |
|
|
3 |
桔红素 |
33.453 |
1.137 |
3.873 |
84056 |
1.03 |
|
重现性：
橙皮苷
|
进样针数 |
t/min |
峰面积 |
峰高 |
理论塔板数 |
拖尾因子 |
分离度 |
|
1 |
11.700 |
70.783 |
242.607 |
10304 |
1.08 |
/ |
|
2 |
11.700 |
69.037 |
236.443 |
10310 |
1.07 |
/ |
|
3 |
11.690 |
70.582 |
242.016 |
10309 |
1.08 |
/ |
|
4 |
11.680 |
68.927 |
235.755 |
10203 |
1.08 |
/ |
|
5 |
11.677 |
70.858 |
242.984 |
10333 |
1.09 |
/ |
川陈皮素
|
进样针数 |
t/min |
峰面积 |
峰高 |
理论塔板数 |
拖尾因子 |
分离度 |
|
1 |
28.373 |
2.148 |
10.252 |
115995 |
1.03 |
12.67 |
|
2 |
28.367 |
2.089 |
9.954 |
115163 |
1.05 |
12.78 |
|
3 |
28.367 |
2.140 |
10.179 |
114816 |
1.04 |
12.57 |
|
4 |
28.363 |
2.087 |
9.962 |
115334 |
1.03 |
12.69 |
|
5 |
28.357 |
2.147 |
10.218 |
114674 |
1.05 |
12.69 |
桔红素
|
进样针数 |
t/min |
峰面积 |
峰高 |
理论塔板数 |
拖尾因子 |
分离度 |
|
1 |
33.457 |
1.170 |
3.986 |
81340 |
1.02 |
/ |
|
2 |
33.453 |
1.137 |
3.873 |
84056 |
1.03 |
/ |
|
3 |
33.453 |
1.159 |
3.956 |
79495 |
1.01 |
/ |
|
4 |
33.443 |
1.136 |
3.859 |
82193 |
1.03 |
/ |
|
5 |
33.437 |
1.158 |
3.959 |
82504 |
1.03 |
/ |
3. 结论
橙皮苷、川陈皮素和桔红素按照新2020版含量检测方法检测，供试品理论塔板数分别为10310，115163，84056，且5次重复实验理论塔板数及保留时间没有下降，故Inertsustain C18适合用于2020版药典广陈皮检测项下含量分析。
说明：本次实验条件按照药典公示稿进行，无改动。
