1. 实验分析
1.1 实验仪器及耗材
■色谱柱:InertSustain AQ 5µm 250×4.6mm (P/N:0502-89731)
■GL Filter针式过滤器(GL0604 25mm x 0.22μm Nylon)
■GL Vial样品瓶(GL0008 2mL透明瓶带刻度+GL0143红膜白胶垫片)
■MPA-200电动移液枪(1065-43503)
1.2 新旧药典对比
检测项目:山奈素-含量测定
药典对比:新增。
【
溶液配制】
对照品溶液的制备 取山柰素对照品适量,精密称定,加80%甲醇制成每1mL含40μg的溶液,即得。
供试品溶液的制备 取本品粉末(过三号筛)约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入80%甲醇50mL,密塞,称定重量,加热回流1小时,放冷,再称定重量,用80%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液10mL,加入盐酸2mL,置90℃水浴中加热水解15 分钟,取出,迅速冷却,转移至50 mL量瓶中,加80%甲醇至刻度,摇匀,即得。
【系统适用性要求】理论板数按山奈素峰计算应不低于5000。
1.3 色谱条件
色谱柱:InertSustain AQ 5µm 250×4.6mm(P/N:0502-89731)
流动相:甲醇-0.4%磷酸(50:50)
流速:1.2mL/min
柱温:25℃
检测波长:360nm
进样量:10μL
最高柱压:209bar
仪器型号:Thermo Ultimate 3000
检测器:DAD
2. 实验结果与讨论
对照品图谱:
序号 |
名称 |
t/min |
峰面积 |
峰高 |
理论塔板数 |
拖尾因子 |
1 |
山奈素 |
39.467 |
16.300 |
16.912 |
10579 |
1.04 |
供试品图谱:
序号 |
名称 |
t/min |
峰面积 |
峰高 |
理论塔板数 |
拖尾因子 |
1 |
山奈素 |
39.550 |
12.921 |
13.452 |
10605 |
1.04 |
数据重现性:
进样针数 |
t/min |
峰面积 |
峰高 |
理论塔板数 |
拖尾因子 |
1 |
39.550 |
12.921 |
13.452 |
10605 |
1.04 |
2 |
39.727 |
13.258 |
13.811 |
10889 |
1.05 |
3 |
39.720 |
13.188 |
13.771 |
10713 |
1.04 |
4 |
39.730 |
13.143 |
13.683 |
10661 |
1.04 |
5 |
39.684 |
13.147 |
13.684 |
10783 |
1.05 |
说明:本实验按药典要求进行分析,没有改动。
3.结论
按照2020版药典要求,使用InertSustain AQ 5µm 250×4.6mm(P/N:0502-89731),对凤仙花中物质含量进行测定,分析效果良好。以山奈素计,其理论塔板数超过10000,满足药典分析要求,且5次实验重复性良好。故InertSustain AQ 5µm 250×4.6mm(P/N:0502-89731)满足2020版药典对凤仙花的分析要求。