1. 实验分析
1.1 实验仪器及耗材
■ 色谱柱:InertSustain C18 5µm 250×4.6mm(P/N:5020-07346)
■ GL Filter针式过滤器(GL0604 25mm x 0.22μm Nylon)
■ GL Vial样品瓶(GL0008 2mL透明瓶带刻度+GL0143红膜白胶垫片)
■ MPA-200电动移液枪(1065-43503)
1.2 新旧药典对比
检测项目:秋水仙碱--含量测定
药典对比:新增
【
溶液配制】
对照品溶液的制备 取秋水仙碱对照品适量,精密称定,加乙醇制成每1mL含24µg的溶液,即得。
供试品溶液的制备 取本品粉末(过三号筛)约2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入0.03mol/L盐酸乙醇溶液(2.7→100)20mL,振荡提取15分钟,放置24小时,滤过,取续滤液,即得。
【系统适用性要求】理论板数按秋水仙碱峰计算应不低于1500。
1.3 色谱条件
色谱柱:InertSustain C18 5µm 250×4.6mm(P/N:5020-07346)
流动相:甲醇-水(45 : 55)
流速:1mL/min
柱温:240℃
检测波长:353nm
进样量:10µL
柱压:138bar
仪器型号:Thermo Ultimate 3000
检测器:DAD
2. 实验结果与讨论
对照品图谱:
序号 |
名称 |
t/min |
峰面积 |
峰高 |
理论塔板数 |
拖尾因子 |
1 |
秋水仙碱 |
12.850 |
4.731 |
111.862 |
6673 |
1.03 |
供试品图谱:
序号 |
名称 |
t/min |
峰面积 |
峰高 |
理论塔板数 |
拖尾因子 |
1 |
秋水仙碱 |
12.853 |
4.989 |
12.482 |
6618 |
1.04 |
数据重现性:
进样针数 |
t/min |
峰面积 |
峰高 |
理论塔板数 |
拖尾因子 |
1 |
12.850 |
4.991 |
12.425 |
6550 |
1.04 |
2 |
12.853 |
4.985 |
12.482 |
6618 |
1.04 |
3 |
12.837 |
5.002 |
12.439 |
6475 |
1.04 |
4 |
12.843 |
4.992 |
12.452 |
6495 |
1.04 |
5 |
12.837 |
5.065 |
12.505 |
6430 |
1.04 |
说明:本实验进样量为10µL时会有前延现象,减少进样量至5µL峰形较好。
3. 结论
按照2020版药典要求,使用InertSustain C18 5µm 250×4.6mm(P/N:5020-07346),对秋水仙中物质含量进行测定,目标物与相邻杂质分离度良好。以秋水仙碱计,其理论塔板数满足药典要求,且5次实验重复性良好。故InertSustain C18 5µm 250×4.6mm(P/N:5020-07346)满足2020版药典对秋水仙的分析要求。