醋酸泼尼松有关物质
1.实验分析
1.1实验仪器及耗材
■色谱柱:InertSustain C18 5μm 250×4.6mm (PN:5020-07346)
■GL Filter针式过滤器(GL0604 25mm x 0.22μm Nylon)
■GL Vial样品瓶(GL0008 2mL透明瓶带刻度+GL0143 红膜白胶垫片)
■MPA-200 电动移液枪(1065-43503)
1.2溶液配制
供试品溶液:取本品细粉适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1mL中约0.5mg的溶液。
对照溶液:取泼尼松对照品与醋酸可的松对照品各适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1mL中各含0.5mg的混合溶液,精密量取1mL与供试品溶液1mL,置同一100mL容量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀。
系统适用性溶液:对照溶液
测定法:精密量取供试品溶液和对照溶液,分别注人液相色谱仪,记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍 。
【系统适用性要求】
系统适用性溶液色谱图中,出峰顺序为:泼尼松,醋酸泼尼松,醋酸可的松,醋酸泼尼松峰与醋酸可的松峰之间的分离度应大于2.5。
1.3色谱条件
色谱柱:InertSustain C18 5μm,250×4.6mm (PN:5020-07346)
流动相:乙腈-水(33 : 67 )
检测波长:240 nm
流速:1.0mL/min
进样量:20µL
柱压:8.0MPa
仪器型号:岛津LC-16
检测器:UV
2.实验结果与讨论
对照溶液图谱:
序号 |
名称 |
t/min |
峰面积 |
峰高 |
理论塔板数 |
拖尾因子 |
1 |
泼尼松 |
8.764 |
363133 |
30114 |
11602 |
1.057 |
2 |
醋酸泼尼松 |
33.162 |
229860 |
6028 |
17105 |
1.014 |
3 |
醋酸可的松 |
36.500 |
262532 |
6299 |
17371 |
1.015 |
供试品图谱:
名称 |
t/min |
峰面积 |
峰高 |
理论塔板数 |
拖尾因子 |
分离度 |
泼尼松 |
8.766 |
50543 |
4260 |
11966 |
1.053 |
|
醋酸泼尼松 |
32.865 |
23409972 |
614971 |
16990 |
1.024 |
36.264 |
醋酸可的松 |
36.169 |
196949 |
4594 |
16702 |
-- |
3.105 |
重复性数据:
醋酸泼尼松:
进样针数 |
t/min |
峰面积 |
峰高 |
理论塔板数 |
拖尾因子 |
分离度 |
1 |
33.162 |
229860 |
6028 |
17105 |
1.014 |
n.a. |
2 |
33.127 |
229143 |
6004 |
16955 |
1.017 |
n.a. |
3 |
33.037 |
233456 |
6152 |
17075 |
1.012 |
n.a. |
4 |
33.060 |
227337 |
5982 |
17193 |
1.013 |
n.a. |
5 |
32.989 |
227018 |
6017 |
17140 |
1.010 |
n.a. |
3.结论
按照2020药典测试要求,使用InertSustain C18 5μm 250×4.6mm (PN:5020-07346) 分析醋酸泼尼松有关物质,醋酸泼尼松峰与醋酸可的松峰分离度满足药典大于2.5的要求。5次数据重复性良好。故InertSustain C18 5μm 250×4.6mm (PN:5020-07346) 适合用于2020版药典对醋酸泼尼松有关物质的分析。