坎地沙坦酯有关物质
1.实验分析
1.1实验仪器及耗材
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色谱柱:Inertsil ODS-HL 5μm 250×4.6mm (PN:5020-87132)
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GL Filter针式过滤器(GL0604 25mm x 0.22μm Nylon)
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GL Vial样品瓶(GL0008 2mL透明瓶带刻度+GL0143 红膜白胶垫片)
-
MPA-200 电动移液枪(1065-43503)
1.2新旧药典对比
检测项目:有关物质测定
药典对比:新增
【
溶液配制】
供试品溶液 取本品细粉适量,加溶剂溶解并稀释制成每1mL中约含坎地沙坦酯0.4mg的溶液,滤过。
对照溶液 精密量取供试品溶液1mL,置100mL量瓶中,用溶剂稀释至刻度,摇匀。
系统适用性贮备溶液 取坎地沙坦酯适量,加溶剂溶解并稀释制成每1mL中约含坎地沙坦酯0.4mg的溶液,取20mL,在90°C水浴加热2小时后 ,放冷,加乙腈至20mL,摇匀。
系统适用性溶液 取杂质Ⅰ对照品适量,加溶剂溶解并稀释制成每1mL中约含40ug的溶液 。取2mL,置20mL量瓶中,用系统适用性贮备溶液稀释至刻度,摇匀。
灵敏度溶液 精密量取对照溶液适量,用溶剂定量稀释制成每1mL中约含坎地沙坦酯0.2μg 的溶液。
测定法 精密量取供试品溶液和对照溶液,分别注人液相色谱仪,记录色谱图。
【系统适用性要求】
系统适用性溶液色谱图中,出峰顺序为杂质Ⅰ峰、杂质Ⅱ峰、杂质Ⅲ峰、坎地沙坦酯峰、杂质Ⅳ峰、杂质V峰与杂质Ⅵ峰;各峰间的分离度均应符合规定。灵敏度溶液色谱图中,坎地沙坦酯峰峰高的信噪比应大于10。
1.3色谱条件
色谱柱:Inertsil ODS-HL 5μm 250×4.6mm (PN:5020-87132)
流动相:以乙腈-冰醋酸-水(57 : 1 : 43)为流动相 A,乙腈-冰醋酸-水(90 : 1 : 10)为流动相B,按下表进行梯度洗脱:
时间(分钟) |
流动相A(%) |
流动相B(%) |
0 |
100 |
0 |
3 |
100 |
0 |
33 |
0 |
100 |
40 |
0 |
100 |
41 |
100 |
0 |
50 |
100 |
0 |
柱温:25 ℃
检测波长:254 nm
流速:1mL/min
进样量:10µL
柱压:86bar
仪器型号:Thermo Ultimate 3000
检测器:DAD
2.实验结果与讨论
灵敏度图谱:
序号 |
名称 |
t/min |
峰面积 |
信噪比 |
理论塔板数 |
拖尾因子 |
1 |
坎地沙坦酯 |
22.650 |
0.057 |
29.2 |
64123 |
0.99 |
对照溶液图谱:
序号 |
名称 |
t/min |
峰面积 |
峰高 |
理论塔板数 |
拖尾因子 |
1 |
坎地沙坦酯 |
22.657 |
1.047 |
4.512 |
59967 |
1.02 |
供试品图谱:
序号 |
名称 |
t/min |
峰面积 |
峰高 |
理论塔板数 |
拖尾因子 |
1 |
坎地沙坦酯 |
22.573 |
104.123 |
449.953 |
59897 |
1.00 |
系统适用性图谱:
序号 |
名称 |
t/min |
峰面积 |
峰高 |
理论塔板数 |
拖尾因子 |
分离度 |
1 |
杂质I |
4.677 |
1.578 |
13.643 |
10361 |
1.09 |
36.73 |
2 |
杂质Ⅱ |
13.860 |
5.791 |
29.235 |
30720 |
1.03 |
16.00 |
3 |
杂质Ⅲ |
19.017 |
0.103 |
0.482 |
53692 |
0.98 |
10.23 |
4 |
坎地沙坦酯 |
22.583 |
83.066 |
359.094 |
59943 |
1.02 |
4.52 |
5 |
杂质IV |
24.260 |
0.271 |
1.177 |
67967 |
1.00 |
15.22 |
6 |
杂质V |
30.017 |
1.099 |
4.565 |
97755 |
1.02 |
15.15 |
7 |
杂质VI |
35.787 |
2.870 |
12.150 |
143761 |
1.03 |
- |
重复性数据:
坎地沙坦酯:
进样针数 |
t/min |
峰面积 |
峰高 |
理论塔板数 |
拖尾因子 |
1 |
22.727 |
106.362 |
476.557 |
65503 |
1.01 |
2 |
22.727 |
106.275 |
475.846 |
65465 |
1.00 |
3 |
22.730 |
106.116 |
475.294 |
65562 |
1.00 |
4 |
22.727 |
106.020 |
474.668 |
65347 |
1.01 |
5 |
22.727 |
106.134 |
475.248 |
65378 |
1.02 |
3.结论
按照2020药典测试要求,使用Inertsil ODS-HL 5μm 250×4.6mm (PN:5020-87132)分析坎地沙坦酯有关物质。各杂质与坎地沙坦酯的分离度良好,且出峰顺序符合药典要求。灵敏度测试,坎地沙坦酯满足信噪比大于10的要求。实验数据重复性良好。故Inertsil ODS-HL 5μm 250×4.6mm (PN:5020-87132)适合用于2020版药典对坎地沙坦酯及有关物质的分析。